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旨在选择小鼠卵巢组织中合适的内参基因,为研究卵巢发育过程中基因表达提供可靠数据。以不同年龄(0日龄、3周龄、5周龄、8周龄)小鼠卵巢组织为试验材料,Trizol法提取样本总RNA,并合成cDNA,根据已报道的小鼠(Mus musculus)各组织中相对稳定表达的8个常见内参基因(Gapdh、β-actin、β-tubulin、18S rRNA、16S rRNA、H2afz、Ubc、Rpl13a)的...
Selection of Reliable Reference Genes for Real-time qRT-PCR Analysis of Zi Geese (Anser anser domestica) Gene Expression
Reference Genes Real-time qRT-PCR Zi Geese Gene Expression
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2016/5/11
Zi geese (Anser anser domestica) belong to the white geese and are excellent layers with a superior feed-to-egg conversion ratio. Quantitative gene expression analysis, such as Real-time qRT-PCR, will...
PCR介导的DNA序列系统分析在系统动物学中的应用
系统动物学 动物分类学 DNA序列分析
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2008/3/13
PCR介导的DNA序列系统分析在系统动物学中的应用。
摘要利用PCR-SSCP技术研究了南阳牛、秦川牛、郏县红牛、西镇牛、鲁西牛和荷斯坦奶牛6个牛品种539个个体leptin基因的遗传多态性。结果表明, PCR扩增产物大小为330 bp, PCR-SSCP分析表现出多态。南阳牛、秦川牛、郏县红牛、西镇牛、鲁西牛和荷斯坦奶牛的A等位基因频率分别为0.558,0.492,0.571,0.658,0.591,0.615;B等位基因频率分别为0.442,0....
小鼠H2Eb位点的PCR-SSP检测与多态性Genetic Diversity Examination of Murine H2Eb by PCR-SSP
H2复合体 PCR-SSP 等位基因
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2008/1/16
摘要为探讨小鼠遗传背景的多态性,我们采用PCR-SSP技术对60只昆明种(KM)小鼠的H2Eb位点第二个外显子的等位基因进行鉴定,得到78个PCR阳性结果,共检出65%的等位基因且43.3%小鼠此位点的基因型相同。KM小鼠具有一定程度的遗传多态性。
Abstract:To explore the diversity of genetic background in Kunming (KM) mi...
南阳牛DGAT2基因PCR-RFLP多态性及其与生长性状相关性研究
DGAT2 南阳牛 PCR-RFLP 生长性状
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2008/1/12
摘要以131头纯种南阳牛为研究材料, 利用PCR-RFLPs对二酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)基因的第6内含子和第7内含子的多态性及其与生长发育的相关性进行了分析。结果表明: 南阳牛在该位点分别检测到两种等位基因A/B和N/M, 频率分别为0.875/0.125和0.971/0.029。A和N等位基因是群体中的优势等位基因。该基因内含子6对南阳牛6月龄的体高、2岁体重、6月龄到两岁的胸围和体斜长...
PCR方法用于奶牛早期胚胎的性别鉴定
PCR 奶牛胚胎 性别鉴定 Y染色体
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2008/1/10
根据牛Y染色体上的特异DNA序列合成一对引物, 通过PCR反应对奶牛早期胚胎进行性别鉴定。预测性别与移植胚胎产犊的实际性别相符率为80%。
微卫星PCR产物变性与非变性PAGE-银染检测方法的比较The Comparision of Denatured and non-denatured PAGE–Silver- Staining Detection of PCR Product of Microsatellites
微卫星 PAGE PCR 银染
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2008/1/8
摘要
用鸡的微卫星引物对6个中国地方鸡种的两个微卫星位点进行PCR扩增。将扩增产物在变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)上进行电泳,经银染,表明微卫星产物在二者上的电泳结果有明显的差异。在非变性聚丙烯酰胺凝胶中,表现为有较多的非特异带,而在变性胶中微卫星扩增产物条带清晰,易于鉴定。Abstract:The genomic DNAs from six chicken breeds in Chin...
竞争性PCR检测MLC_2-糜酶融合基因在转基因小鼠中的组织特异性表达
糜酶基因表达 肌球蛋白轻链启动子 转基因小鼠 竞争性聚合酶链反应
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2007/12/21
摘要 用竞争性 P C R 方法定量检测了大鼠肌球蛋白轻链 2 启动子(m yosin light chain 2 prom oter, M L C2)糜酶(chym ase)融合基因在转基因小鼠不同组织中的表达情况,发现 M L C2chym ase融合基因在转基因小鼠的心脏中有较高水平的表达,在骨骼肌中表达水平较低,在肾脏中有微弱表达;而在肝脏和肺中未检测到.表明 M L C2...
两温度梯度多重PCR鉴别牛早期胚胎性别的技术研究
性别鉴别 两温度梯度PCR 胚胎
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2007/12/21
摘要稳定、可靠和快速的牛胚胎性别鉴定方法在生产应用中具有重要意义。通过两温度梯度PCR方法对牛基因组、克隆胚胎、胚胎样品进行性别鉴别实验研究,建立了稳定、简便、快速的牛早期胚胎性别鉴别两温度梯度PCR方法,鉴定时间仅为57分钟。采用两温度梯度PCR方法对30枚奶牛胚胎进行了早期性别鉴别,并将鉴别的15枚胚胎(11枚为雌性,4枚为雄性)移植到同期处理的15头受体母牛体内。60天后妊娠检查,有7个受体...
改进竞争性RT-PCR法测定缺碘大鼠颅骨中BMP-2基因表达变化
碘缺乏 骨发育 RNA竞争模板 骨形态发生蛋白2
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2007/12/21
摘要 为更加精确地测定碘缺乏状态下大鼠颅骨组织中骨形态发生蛋白 2 (BMP 2 )mRNA表达水平 ,改进竞争性RT PCR方法 ,探讨碘缺乏对骨骼发育影响的分子机制 .将构建的DNA竞争模板克隆入pSportⅠ质粒中 ,利用pSportⅠ质粒中所含有的SP6RNA聚合酶启动子序列 ,将DNA竞争模板在体外转录成为RNA .以此RNA作为竞争性RT PCR中的竞争模板 ,与所提取的总RNA一同...
多等位基因PCR-SSO反相杂交法及其在HLA-DR_4亚型结构分析中的应用
反相杂交法 多等位基因检测 HLA DR_4
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2007/12/20
摘要 本文介绍一种适合于多等位基因定型和结构分析的反相顺序特异性寡核苷酸探针杂交方法。将化学合成的多种探针分别经脱氧核苷末端转移酶(TdT)催化,于3′端加上100个以上碱基的Poly(dT)尾,然后将各探针分别以斑点固定于同一张尼龙膜上。用PCR法对该基因位点进行扩增,扩增的同时加入α-~(32)P-dCTP以直接参入放射标记,然后将PCR产物与膜固定探针杂交,以四甲基氯化铵根据探针长度统一洗涤...
单纯疱疹病毒的PCR直接基因分型
聚合酶链反应 基因分型 单纯庖疹病毒
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2007/12/20
摘要 本文利用PCR技术建立一种对HSV直接基因分型的方法。在HSV-Ⅰ、Ⅱ两型的DNA多聚酶基因上设计了一条两型共同的上游引物(HDP-B)和两条型特异的下游引物(HDP-1、HDP-2)。三条引物共同组成一个扩增反应体系,在HSV-Ⅰ产生543bp条带,HSV-Ⅱ产生372bp条带,据此在基因水平上对HSV进行分型。5株不同来源的HSV(2株Ⅰ型,3株Ⅱ型)分型结果与病毒分离及血清学方法完全一...
大鼠肝脏脂酶基因的PCR扩增、序列分析和克隆
大鼠肝脏脂酶基因 序列分析 聚合酶链式反应 表达载体pGT-d
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2007/12/20
摘要 报导了应用聚合酶链式反应(PCR)技术,扩增大鼠肝脏脂酶基因及其克隆和序列分析的结果.经31个循环的扩增,得到大鼠肝脏脂酶及其N端结构域的cDNA,前者为1508bp的片段,后者为1076bp的片段.克隆后,对此二片段进行了限制性内切酶物理图谱分析,测定了DNA序列,并已将它们克隆到表达载体pGT-d中.
PCR-SSCP分析结合直接测序检测β-地中海贫血患者基因突变型
β-Thalassemia PCR-SSCP Direct sequencing
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2007/12/20
Three mutative types of β-globin gene in 10 patients with β-thalassemia were detectedby PCR-SSCP analysis and direct sequencing. Among them, allo-double heterozygote mutation appeared in two patients....