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搜索结果: 1-13 共查到SYBR Green I相关记录13条 . 查询时间(0.078 秒)
为了建立鳗鲡疱疹病毒(Anguillid herpesvirus, AngHV)的SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR(qPCR)检测方法,利用PCR扩增出AngHV ORF49的序列,克隆至pET-32a载体,构建重组质粒pET-32a-ORF49,作为qPCR的标准品;根据ORF49序列设计引物,以梯度稀释的质粒标准品为模板,进行SYBR Green Ⅰ qPCR扩增,制作标准曲线,建立...
日前,中国水产科学研究院黑龙江水产研究所李绍戊等人完成的“杀鲑气单胞菌的SYBR Green I实时定量PCR检测方法及其应用”获得国家发明专利授权,专利授权号:ZL201611031012.6。
基于SYBR Green Ⅰ荧光染料建立鉴定鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium,MA)的荧光PCR熔解曲线法,为临床鉴定MA提供简单、准确性高的分子生物学检测方法。 方法:以MA的特异性插入序列IS1311为检测靶标设计引物,在60 ℃的退火温度下,建立鉴定MA的SYBR Green Ⅰ荧光PCR熔解曲线方法,并对MA等21种分枝杆菌标准株和金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌进行检测,...
根据番茄褪绿病毒(Tomato chlorosis virus, ToCV)热激蛋白70(Hsp70)的基因序列,设计ToCV实时荧光定量PCR特异引物。利用重组质粒ToCV-1为标准品建立SYBR Green I实时荧光定量方法。针对引物浓度、退火温度、特异性、灵敏度、重复性和稳定性进行系列优化。结果表明,最适退火温度为63℃,最适引物浓度为0.3 μmol·L-1。熔解曲线为特异性单峰,表明其...
Quantitative real-time RT-PCR (qRT-PCR) assay was developed for the detection and quantification of bovine viral diarrhea virus (BVDV) in clinical samples from persistently infected cattle. qRT-PCR wa...
根据GenBank 登录的水貂肠炎病毒(MEV)VP2 蛋白基因的保守序列设计了1 对特异性引物,经PCR 扩增出146 bp 的目的片段,并克隆到pMD 18 - T 载体上,提取重组质粒经PCR 及测序鉴定正确后,以10 倍梯度稀释质粒作为阳性标准品,绘制荧光定量标准曲线,以此建立一种基于SYBR Green 荧光染料的定量PCR 特异性检测水貂肠炎病毒的方法。结果表明:该方法对MEV 有很好...
旨在建立一种检测马Toll样受体(TLRs)mRNA表达水平的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR(Rverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)方法。参照GenBank中马TLRs的基因序列保守区设计特异性引物,以马β肌动蛋白(β-actin)mRNA为内参,建立荧光定量RT-PCR方法。结果,扩增曲线在1×102~1×108 copies...
基于霍乱弧菌lolB基因保守序列设计1对特异性引物,建立了SYBR GreenⅠ实时定量PCR检测霍乱弧菌的方法。常规PCR检测仅霍乱弧菌扩增出大小为519bp的目的片段,其他3种病原弧菌均为阴性;SYBR GreenⅠ实时定量PCR,在Tm为86.5~87 ℃,扩增产物的熔解曲线只出现1个单特异峰,无引物二聚体,表明该引物具有较好的特异性。SYBR GreenⅠ实时定量PCR扩增曲线反映了PCR...
本研究旨在建立一种能够快速、简便、灵敏地检测猪星状病毒的基于SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法。根据已报道的猪星状病毒ORF2基因序列,设计并合成1对引物,通过PCR扩增ORF2基因片段,将测序正确的ORF2基因片段克隆入pMD18-T载体,转化大肠杆菌DH5α,经测序鉴定后得到阳性重组质粒,作为标准品模板建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线,并对其灵敏性、特异...
谷胱甘肽S转移酶M1(glutathione S-transferase M1, GSTM1)基因是参与体内多种致癌物代谢的重要的II相代谢酶,其基因多态性被认为与人肺癌遗传易感性有关。本研究旨在探讨天津地区汉族人群GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间的关系。方法 采用SYBR green I实时荧光PCR熔解曲线分析方法检测天津地区265例肺癌患者和307例对照者GSTM1基因多态性,应用病...
利用SYBR Green检测衣原体Real-Time PCR方法的建立     SYBR Green  衣原体  Real-Time PCR  检测       font style='font-size:12px;'> 2008/4/22
利用SYBR Green建立了检测种特异性衣原体的Real-Time PCR方法。本方法应用衣原体种特异性的高度保守特异引物,能够扩增627 bp特异片段;使用定量标准基因组DNA,本方法能准确检测最少250 fg衣原体DNA。Real-Time PCR方法与免疫荧光方法的检测结果表明:检测4种衣原体临床样本,Real-Time PCR敏感性均在96%~98%;特异性均为100%;这两种方法符合率...
SYBR Green I荧光 RT-PCR方法检测禽流感病毒     禽流感病毒  SYBR Green I RT-PCR   RT-PCR  病毒滴定  检测       font style='font-size:12px;'> 2008/3/24
为建立检测禽流感病毒(AIV)的SYBR Green I荧光 RT-PCR方法,根据AIV的 M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞,收集感染6、12、24、48、72 h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测,试图建立快速检测AIV的SYBR Green I荧光RT-PCR方法,并与普通RT-PCR方法和传统的病毒滴定方法进...
摘要 为建立一种新的SYBRgreenⅠ实时定量RT PCR方法 ,使之能够有效消除引物二聚体 (PDs)对实时定量结果的影响 .对RT PCR特异性扩增产物和PDs分别进行了凝胶电泳检测和熔解曲线分析 .依据PDs和扩增产物的熔解温度 (Tm)特点 ,在通用的三步法的延伸步骤之后 ,增加一个短暂的 (5s)恒温和荧光检测步骤 ,使这个步骤的温度高于PDs的Tm,但低于扩增产物的Tm,简称该法为四...

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