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通过农杆菌介导法将兔防御素NP-1基因导入毛白杨(P.tomentosa)
兔防御素基因 叶盘法 转化 毛白杨
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2008/2/1
摘要采用叶盘法将兔防御素NP-1基因导入毛白杨后，经PCR分析、Southern杂交检测与筛选获得了转基因植株。并经体外抑菌实验表明，转NP-1基因毛白杨植株组织提取物对某些微生物的生长具有明显的抑制作用。
摘要用含Tn5转座子的质粒pRL1063a诱变苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti) 042BM,得到盐敏感突变株042BML-2。采用转座子挽救法对Tn5插入位点两边的序列进行克隆与测序，获得了1 179 bp的转座子插入位点侧翼DNA序列。在GenBank中进行序列同源性和基因定位分析,结果表明：转座子插入在一个功能未知的基因内部，此基因长6 270 bp。研究证明：该...
破骨细胞形成抑制因子TNFR结构区在大肠杆菌中表达、抗体制备及活性测定
破骨细胞形成抑制因TNFR结构区 大肠杆菌 抗体 降血钙活性
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2008/2/1
摘要破骨细胞形成抑制因子(OPG)对骨的重建与再吸收有重要调节作用，其TNFR结构区行使抑制破骨细胞形成与活性的功能。通过PCR将该区基因片段克隆出来，插入表达载体PET-28a质粒多克隆位点，重组质粒转入大肠杆菌BL21中进行表达，表达产物以包涵体形式存在，包涵体经变性复性后，亲合层析获得重组蛋白。纯化的产物作为抗原免疫兔，得到较高特异性的兔源多克隆抗体。利用小鼠降血钙实验检测变性复性后产物的活...
盐生盐杆菌的质粒及其物理图谱
盐生盐杆菌 质粒 物理图谱
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2008/2/1
摘要本文用4种不同的方法对10株盐生盐杆菌(Halobacterium halobium)是否含有质粒进行了检测,其中6株(S9、RF1、J7、R6-4、R6-5、T4-1)含有质粒,均属大质粒。几种检测方法中,以TENS法效果取好。J7图株含有1种CC C结构十分稳定的质粒,称之为pHH205,其分子量较小,约为16.7kb;拷贝数较高,为49个/每个细胞。该质粒在宿主的对数生长后期出现拷贝数高...
浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌PBPs基因及氨基酸序列研究
肺炎链球菌（SP） 青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP) 青霉素结合蛋白(PBPs)
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2008/1/31
摘要为阐明温州地区青霉素耐药肺炎链球菌（PRSP）的青霉素结合蛋白（PBPs）的基因和氨基酸序列的变异特点，对温州医学院自2000年11月～2004年1月收集的26份肺炎链球菌进行分离、鉴定及青霉素药敏实验，并对每株链球菌的PBP1A、PBP2B、PBP2X基因进行PCR扩增和直接测序，通过序列比对与生物信息学分析。结果表明，研究中的PBP1A的主要突变位点是保守基序KTG之后的4个连续氨基酸替换...
铜绿假单胞菌最佳电转化条件的研究
铜绿假单胞菌 电转化 Mu转座复合物
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2008/1/31
摘要以临床分离的一株铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginos a)PA68作受体菌，将 具有卡那霉素抗性标记的质粒pSMC28通过电转化导入到受体菌中，研究细胞生长状态、电击 电压、细胞浓度、感受态细胞的贮备方式对转化效率的影响。结果表明，在细胞生长至OD 540 =0.7～0.8时收集菌体，在低温(2℃)条件下，制备浓度为10 11 个细胞/ mL的感受态细胞，在较高的电压(2...
利用抑制消减杂交技术研究结核分支杆菌强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra的基因差异
结核杆菌 抑制消减杂交技术 差异基因
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2008/1/31
摘要为了解结核病的致病分子机理和筛选结核病致病菌的毒力基因，利用抑制消减杂交（SSH）技术分析了结核分支杆菌强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra间的基因组DNA间差异。通过Southern杂交验证及序列分析得到仅在强毒株H37Rv基因组中有的DNA片段8个，其中一个编码已知的毒力因子mce蛋白，1个编码PE家族蛋白，1个编码purC合成酶，和4个潜在蛋白，另1个为非编码区片段。其中有2个基因经PCR...
棉枯萎病菌异核体及其不同表型分离子在基因转录水平上的差异
棉花枯萎病菌 异核体 mRNA差异显示
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2008/1/30
摘要采用银染mRNA差异显示技术,研究了棉花枯萎病菌异核体菌株（Ag149）及其两个不同表型分离子（Ag149-Ⅰ和Ag149-Ⅲ）之间差异表达的基因，观察到在300～700 bp之间出现了19个差异条带,经反向RNA印迹，证实其中2条差异带为阳性：编号为C6的差异条带在Ag149和Ag149-Ⅰ菌株中呈高表达，而编号为G5的差异条带在菌株Ag149和Ag149-Ⅲ中呈高表达。这两条差异片段经测序...
利用整合载体构建苏云金芽胞杆菌杀虫工程菌
苏云金芽胞杆菌 整合载体 整合重组子 甜菜夜蛾
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2008/1/30
摘要 摘 要:利用由苏云金芽胞杆菌整合子Tn4430衍生出的整合载体pBMB-F7E，克隆了对鳞翅目夜蛾科昆虫有毒力的杀虫晶体蛋白基因cry1C，获得了整合重组质粒pBMB-FLC。用电脉冲法将该重组质粒转入对鳞翅目昆虫高毒力的野生菌株YBT803-1，在46℃下，经过约120代转接培养后，筛选出在染色体基因组上整合了cry1C基因的重组子，整合频率约为3.4×10-5。Southern blot...
木质素降解条件下黄孢原毛平革菌lip基因转录调控序列的筛选与鉴定
黄孢原毛平革菌 木质素过氧化物酶基因 凝胶迁移率变动分析 DNA结合蛋白 顺式作用元件
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2008/1/30
摘要用DNA-蛋白质体外结合实验和凝胶迁移率变动分析技术筛选黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）木质素过氧化物酶基因lipA、lipC、lipF的5′-端调控区内能与该菌在木质素降解条件下形成的蛋白特异结合的顺式作用元件。结果表明，来自lipC、lipF基因的5′-端片段LG2P3(396 bp)和 LG6S1-2（738 bp）能特异结合培养于Kirk低氮培养...
毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)在链霉菌中的表达研究
CTLA-4 基因表达 变铅青链霉菌
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2008/1/30
摘要应用两种链霉菌新型信号肽-vsi和gpp在常用工程菌变铅青链霉菌(Streptomyces lividans)中进行了CTLA-4的分泌表达研究。vsi信号肽与CTLA-4的融合片段克隆至链霉菌-大肠杆菌穿梭质粒pUWL-219,同时gpp信号肽与CTLA-4片段在质粒pLNSP中融合,分别转化 S. lividans TK24,获得重组菌株S.lividans[pUWL219-VC]和S.l...
铜和其他重金属离子诱导大肠杆菌抗铜启动子的研究
抗铜启动子 Copper box 诱导 生物荧光
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2008/1/30
摘要通过测定荧光酶活性研究了大肠杆菌抗铜基因上的两个铜诱导的启动子。结果表明，在缺少抗铜质粒pBIN19pco的情况下，启动子PpcoA box-lux和PpcoA long-lux的最大诱导均出现在5mmol/LCuSO4，而且PpcoA box是一个比PpcoA long强的启动子；铜对两个PpcoE-lux构建的诱导的生物荧光曲线中，有两个峰，第一个峰出现在0.5mmol/L CuSO4时，...
霍乱弧菌Tat蛋白运输系统基因簇的确定与功能阻断分析
霍乱弧菌 Tat蛋白运输 分泌阻断
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2008/1/30
摘要Tat(Twin-arginine translocation)双精氨酸转运系统是最新证实的原核生物细菌中运输折叠蛋白的主要途径。是与经典的sec分泌系统完全不同的蛋白运输系统。通过对已测序的O1群霍乱弧菌E1 Tol生物型菌株N16961基因组分析,并与大肠杆菌TatA、B、C、D同源蛋白进行了氨基酸和基因序列的同源比较,对大肠杆菌tatA、tatB、tatC具有同源性的基因采用自杀质粒同源...
摘要 所有测试过的Bacillus subsilis菌株都对37.5 pgCr03/m1敏感。以紫外线照射168 trPC2+菌株，很容易从中分离到抗100----150pgCr03/n-i1的突变体。多次企图通过转化或转导将此抗性转移到其他菌株，均未获成功。而以所有三种位点的半脸氨酸缺陷菌株为受体进行转化或转导，所得到的C ys+转化体或转导体却都能抗50--75pgCr03/ m1。在肉汤琼脂...