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PAI-1对炎症性肠病大鼠模型内质网应激的相关影响研究
纤溶酶原激活剂抑制物-1 炎症性肠病 内质网应激
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2020/12/16
探究纤溶酶原激活剂抑制物-1（PAI-1）基因对炎症性肠病（IBD）大鼠模型内质网应激的相关影响。方法将Wistar大鼠24只分为正常对照（control）组、IBD大鼠模型（IBD）组、KnockoutPAI-1正常大鼠模型（KnockoutPAI-1control）组、KnockoutPAI-1+IBD大鼠模型（KnockoutPAI-1+IBD）组，每组6只。采用2,4,6-三硝基苯磺酸（T...
ACE基因多态性与高血压肾脏损害及PAI-1的关系The Relationship between Angiotensin Converting Enzyme Gene Polymorphism and Hypertensive Kidney Lesion and PAI-1 in Hypertension Patients
血管紧张素转换酶 基因多态性 高血压病 肾损害
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2008/1/16
为探讨血管紧张素转换酶（ACE）基因多态性与高血压肾损害和纤溶酶原激活物抑制物-1（PAI-1）的关系，应用聚合酶链反应（PCR）检测96例正常人、67例高血压无肾脏损害患者和70例高血压伴肾损害患者的ACE基因型，采用ELISA法检测血浆PAI-1。ACE基因I/D多态性与高血压病无明显相关，但高血压肾损害患者DD基因型频率及D等位基因频率显著高于对照组和高血压无肾脏损害组，χ2值分别为6.85...
亲和层析纯化HepG_2细胞分泌的PAI-1
ＰＡＩ－１ 抗ＰＡＩ－１ＭｃＡｂ 免疫亲和层析 ＨｅｐＧ_２细胞
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2007/12/24
摘要 本文报道用抗ＰＡＩ－１单克隆抗体（ＭｃＡｂ）亲和层析建立了纯化ＰＡＩ－１的简便方法。经免疫亲和层析，ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ２００凝胶过滤，从ＨｅｐＧ２细胞培液中分离到糖基化和非糖基化两种形式的ＰＡＩ－１，回收率为８４％，ＰＡＩ－１比活性６．１×１０４ＩＵ／ｍｇ。糖基化ＰＡＩ－１分子量为５０ｋＤ，比活性５．８×１０４ＩＵ／ｍｇ。非糖基化ＰＡＩ－１分子量４３ｋＤ，占总ＰＡＩ－１３０％，仍具有ＰＡＩ...
ut-PA抗PAI-1突变体的构建及在sf-9细胞中的表达
抗PAI-1抗性 嵌合蛋白ut-PA(1) 表达
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2007/12/19
摘要 为使嵌合分子 ut- PA获得抗 PAI- 1抑制作用的性质 ,将删除了编码 u- PA中 R1 78- R1 79-H1 80 - R1 81的 1 2个核苷酸的 u- PA c DNA[u- PA( 1 ) ]的 Bam H - Eco R 部分酶切片段 ,克隆到含嵌合蛋白 ut- PA基因的转移载体 p VL 1 392 - ut- PA的相应位点中 ,构建了一个含有新的嵌合蛋白基因 ...
Lys_(10)-PAI-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化和凝胶阻滞实验
纤溶酶原激活剂抑制物-1 凝胶阻滞实验 融合基因 表达与纯化
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2007/12/19
摘要 用PCR方法构建 10个赖氨酸与纤溶酶原激活剂抑制物 1的融合基因Lys10 PAI 1,并克隆于pET2 8a(+ )和pET32a(+ )原核表达载体 .将重组表达质粒pET32 PAI和pET2 8 PAI转化大肠杆菌BL2 1(DE3) .IPTG诱导后可获得分子量分别为 6 3kD和 4 3kD的目的蛋白 ,表达蛋白占菌体蛋白2 0 %以上 ,大多数重组蛋白以不溶形式存在 ....
大肠杆菌表达的重组人PAI-1的纯化
Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制剂 纯化 包含体
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2007/12/19
摘要 纯化了工程细菌表达的可溶态和包含体形式的ｒｈＰＡＩ－１，纯度均达９８％，其ｒｈＰＡＩ－１蛋白质得率分别为１５％和１９％，比活性分别为３３５００ＩＵ／ｍｇ和２７７０００ＩＵ／ｍｇ。Ｎ端氨基酸序列分析显示，ｒｈＰＡＩ－１Ｎ端１５个氨基酸与天然ＰＡＩ－１完全一致；包含体复性研究表明，包含体的复性与复性蛋白的浓度及复性液中助溶剂的浓度密切相关。纯化的ｒｈＰＡＩ－１为分析ＰＡＩ－１结构与功能及探讨其临...
人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在大肠杆菌中的表达和分离纯化
纤溶酶原激活剂抑制物２型 原核表达 分离纯化
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2007/12/18
摘要 用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）ｃＤＮＡ，与ｐＵＣ１８重组，经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析，获得全长人ＰＡＩ－２ｃＤＮＡ．ＰＡＩ－２ｃＤＮＡ与原核表达载体重组，构建原核表达质粒并转化大肠杆菌．经温度诱导表达，重组ＰＡＩ－２占全菌总蛋白的１４％，以可溶性形式存在，具纤溶抑制活性．工程菌发酵、压榨后，用硫酸铵分级沉淀，沉淀物经分子筛、离子交换和疏...
人纤溶酶原激活剂抑制物2型(PAI-2)在Pichia pastoris中的表达
纤溶酶原激活剂抑制物２型 酵母表达
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2007/12/18
摘要 用ＰＣＲ方法从ｐＰＡＩＪ．７中扩增人纤溶酶原激活剂抑制物２型（ＰＡＩ－２）基因，与ｐＰＵＣ１８重组，经限制性内切酶片段分析与核苷酸序列分析，获得全长人ＰＡＩ－２基因．ＰＡＩ－２基因与表达载体ｐＰＩＣ９重组，构建受乙醇氧化酶１基因（ＡＯＸ１）启动子与转录终止区控制的酵母表达质粒，转化ＧＳ１１５宿主菌，经表型筛选和ＰＣＲ扩增筛选阳性克隆，用甲醇诱导表达，重组ＰＡＩ－２以分泌型表达，占分泌总蛋白的...
重组PAI-1对u-PA抑制活性的研究
重组ｒＰＡＩ－１ ｕ－ＰＡ 抑制活性
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2007/12/18
摘要 利用大肠杆菌表达的重组纤溶酶原激活物抑制因子－１（ｒＰＡＩ－１）具有许多与天然ＰＡＩ－１相同的性质，ｒＰＡＩ－１对ｕ－ＰＡ抑制活性研究的内容包括：几种化学物质（盐酸胍、尿素、硫氰酸钾、ＳＤＳ、氯化钠等）对ｒＰＡＩ－１的激活作用、盐酸胍激活ｒＰＡＩ－１的浓度与温度效应、显色底物法和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ纤维蛋白自显影对ｒＰＡＩ－１活性的测定、活性态ｒＰＡＩ－１向潜状态的转变及其与盐浓度和ｐＨ值的关系...