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Gap-Repair方式建立一种基于pBR322-Red的新型重组工程系统
Gap-Repair Red重组酶 重组工程
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2008/1/21
摘要应用Gap-Repair新技术，以pBR322为载体，在λ噬菌体Red重组酶的作用下，通过同源重组直接从大肠杆菌DY330染色体上亚克隆了长度为6.7 kb的包含Red重组酶基因的λ噬菌体左向操纵子基因序列。建立了一种能够随意在不同细菌宿主中转移的基于pBR322-Red的重组工程系统。为了验证pBR322-Red的生物功能，以大肠杆菌染色体上的galk基因为靶标，用Red介导的单链DNA重组...
pBR322-Red介导的E．Coli染色体基因敲入、位点及表达研究
pBR322-Red 重组工程 基因敲入 霍乱毒素B亚单位
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2007/12/20
摘要应用pBR322-Red介导的重组工程系统，Kan/sacB选择反选择系统，双链线性DNA重组技术和重叠引物介导的DNA重组技术，将长度为1 653 bp的luc报告基因分别敲入到E.coli W3110染色体lacZ, lacY和lacA基因的位置，建立了一系列具有新遗传表型的菌株：CWL2、CWL4和CWL6。荧光素酶分析表明，外源报告基因luc能在这3个结构基因处有效的组成型表达。为了进...
pBR322-Red在大肠杆菌lac操 纵子基因敲除和敲入中的应用
pBR322-Red 同源重组 lac 操纵子 敲除 敲入
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2007/12/10
pBR322一Red是一种新型重组工程系统，它携带了 一噬菌体Red重组酶基因和一系列调控元件 对pBR322一Red最优重组条件进行探索后应用该质粒提供的体内同源重组功能，在菌株W3110体内，对染色体上的 操纵子进行了基因修饰，包括：① 运用kan／sacB选择反选择方法和重叠引物方法敲除了阻遏基因lacl，② 运用kan／sacB 选择反选择方法和线性双链DNA 介导的DNA重组方法将报告基...