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Gap-Repair方式建立一种基于pBR322-Red的新型重组工程系统
Gap-Repair Red重组酶 重组工程
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2008/1/21
摘要应用Gap-Repair新技术，以pBR322为载体，在λ噬菌体Red重组酶的作用下，通过同源重组直接从大肠杆菌DY330染色体上亚克隆了长度为6.7 kb的包含Red重组酶基因的λ噬菌体左向操纵子基因序列。建立了一种能够随意在不同细菌宿主中转移的基于pBR322-Red的重组工程系统。为了验证pBR322-Red的生物功能，以大肠杆菌染色体上的galk基因为靶标，用Red介导的单链DNA重组...
Red重组系统及在微生物基因敲除中的应用--The Red Recombination System and Its Application to Gene Knock-out in Microorganism
Red重组系统 基因敲除 抗药性基因 Red recombination system gene knock-out resistant gene
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2007/12/5
在完成了对各种微生物基因组的测序以后，功能基因学的研究变得尤为重要。研究基因功能最直接的方法便是将待研究的基因失活。最初构建基因突变体是采用大肠杆菌的RecA系统，但是RecA重组系统操作复杂，重组效率低。最近建立了Red重组系统，该系统由3个蛋白组成：α蛋白(即λ核酸外切酶)，β蛋白，Gam蛋白。应用Red系统进行基因敲除，可以直接利用线性打靶DNA，两侧同源臂长度在35~60 bp即可发生同源...