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热休克因子1对内毒素所致G-CSF基因表达的影响
热休克因子1 RAW264.7巨噬细胞 内毒素 粒细胞集落刺激因子 热休克反应
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2007/12/24
摘要 为探讨热休克因子 1(heatshockfactor 1,HSF1)活化和过表达对内毒素 (endotoxin ,ET)所致粒细胞集落刺激因子 (granulocyte colonystimulatingfactor,G CSF)基因表达的影响 ,采用大肠杆菌内毒素即脂多糖 (lipopolysaccharide ,LPS)处理RAW2 6 4 7巨噬细胞 ,并通过热休克预处理诱导HSF1活...
共表达人p53、GM-CSF和B7-1基因的重组腺病毒的构建
腺病毒 抑癌基因p53 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 免疫共刺激分子B7-1 基因治疗
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2007/12/21
摘要 为开展肿瘤的复合基因治疗 ,构建以串联方式携带人野生型p53、GM CSF和B7 1基因的重组腺病毒穿梭质粒pBB 1 0 2 .将pBB 1 0 2与腺病毒包装质粒GT40 50共转染 2 93细胞 ,通过细胞内同源重组获得重组腺病毒BB 1 0 2 .在 2 93细胞中扩增病毒 ,并通过氯化铯密度梯度超速离心纯化病毒 ,获得高滴度和高纯度的病毒 .分别经免疫组织化学分析、ELISA和流式...
人G-CSF转基因鼠的稳定遗传与表达
人Ｇ－ＣＳＦ 遗传 转基因鼠
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2007/12/18
摘要 利用人粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）基因组基因作为目的片段，将其受控于２．６ｋｂ的小鼠乳清酸蛋白（ＷＡＰ）基因的调控区下，通过显微注射法获得了两只整合有人Ｇ－ＣＳＦ转基因小鼠，通过繁殖建立了稳定的转基因系．一些表型参数测定表明转基因鼠与正常鼠无明显差别．通过ＲＴ－ＰＣＲ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，在乳腺表达出人Ｇ－ＣＳＦ，为乳腺表达外源蛋白质及今后大动物研究奠定了基础．
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人粒细胞集落刺激因子(hG-CSF)cDNA3′-UTR对其表达的影响
ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ ３′－ＵＴＲ 表达调控
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2007/12/18
摘要 利用人粒细胞集落刺激因子（ｈＧ－ＣＳＦ）ｃＤＮＡ３′端非翻译区（３′－ＵＴＲ）中存在的ＤｒａⅠ酶切位点，通过部分酶切与完全酶切，删除３′－ＵＴＲ不同长度，构建了四种ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ瞬时重组表达质粒。转染ＣＯＳ－７细胞后，生物活性测定结果提示，ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ３′－ＵＴＲ对其表达起负调控作用，其关键性序列位于紧接终止密码子ＴＧＡ下游的６５ｂｐ范围内，３′－ＵＴＲ对ｈＧ－ＣＳＦｃＤＮＡ表...