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人Mn-SOD cDNA的克隆及其在巴斯德毕赤酵母中的表达
人锰超氧化物歧化酶 巴斯德毕赤酵母 分泌表达
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2007/12/10
以人肝细胞株(k02)总RNA为模板，用RT-PCR扩增出人锰超氧化物歧化酶(hMn—SOD)cDNA，将其插入含有AOX1基因启动子和a分泌信号肽序列的毕赤酵母表达载体pPIC9k，构建重组质粒pPIC9k—MnSOD，转化毕赤酵母GS115，筛选出整合了多拷贝hMn—SOD基因的Mut 表型菌株，摇瓶培养，0．5％甲醇诱导表达。SDS—PAGE分析显示，诱导4d的培养上清中hMn—SOD 的表...