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β 内酰胺酶E166C突变型的原核表达、 纯化及鉴定
β 内酰胺酶E166C突变体 PCR 介导的定点突变 蛋白纯化及鉴定
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2015/11/4
目的〖HTSS〗〓本研究旨在构建β 内酰胺酶E166C突变体并于大肠杆菌中原核表达，纯化及鉴定该蛋白。〖HTH〗方法〓〖HTSS〗利用体外PCR扩增获得β 内酰胺酶penP突变质粒并通过DNA测序鉴定，将重组质粒转化至BL21(DE3) 中，以IPTG 诱导蛋白表达。菌液超声裂解后首先以镍柱纯化融合蛋白，蛋白水解酶 HRV3C 除去融合标签，然后用凝胶过滤层析色谱进一步纯化得到目标蛋白，最后应用S...