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泡桐丛枝植原体pPaWBNy-1-ORF5编码蛋白的原核表达和抗体制备
泡桐丛枝病 植原体 茶翅蝽 原核表达 免疫印迹
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2013/10/20
利用含泡桐丛枝植原体质粒pPaWBNy-1的3.0 kb片段的克隆为模板,PCR扩增pPaWBNy-1-ORF5的亲水性肽段编码区。目的片段连接到原核表达载体pET28a(+),重组质粒pET28a-ORF5-5转化大肠杆菌(Escherichia coli)Rosseta (DE3)感受态细胞,菌液处在对数生长期时(OD600=0.52),添加IPTG诱导5 h后收集菌体,提取蛋白并进行聚丙烯酰...