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旨在探究血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在绵羊卵母细胞体外成熟过程中对DNMT3a的影响。本研究采用RNA干扰和显微注射技术将针对VEGF两个受体FLT1和KDR/Flk-1的有效干扰片段导入到绵羊卵丘-卵母细胞复合体(Cumulus-oocytes complexes,COCs)中,检测体外成熟培养各时间卵母细胞和颗粒细胞中DNM...
探讨子宫内自然杀伤细胞(uNK)及血管内皮细胞生长因子(VEGF)在正常妊娠山羊子宫的动态分布规律。采用免疫组织化学技术对uNK细胞和VEGF在妊娠山羊子宫内的分布以及含量的动态变化进行研究,并通过RT-PCR技术检测VEGF mRNA的动态转录水平。结果显示:在妊娠早期,uNK细胞和VEGF大量存在于蜕膜部;妊娠中期,在子宫基质、腺体和肌层血管处检测到大量uNK细胞和VEGF表达;在妊娠后期,u...
血管内皮生长因子(VEGF)实时荧光定量PCR质粒标准品的构建
实时荧光定量 VEGF基因 质粒标准品
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2012/2/15
应用SYBR Green荧光染料检测方法构建VEGF基因质粒标准品,能快速、灵敏、可靠的检测与临床多种疾病密切相关的重要候选基因血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。本研究利用版纳微型猪近交系4~6月龄猪,提取皮肤创面总RNA,设计特异引物,进行RT PCR扩增。纯化目的片段并与pMD18T载体连接,转化宿主菌DH5α,提取重组质粒DNA,并经酶切、PCR和测序鉴定,计算重组质粒原液拷贝数浓度并...