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烟粉虱MEAM1隐种漆酶-1基因全长cDNA克隆、 序列分析与组织表达
烟粉虱MEAM1隐种 漆酶1基因 多酚氧化酶 表达谱 荧光定量PCR
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2013/9/12
多酚氧化酶是多种刺吸式昆虫唾液中的关键酶类, 可以通过干扰寄主植物正常的氧化还原反应来调控食物来源使其更有利于昆虫本身。昆虫体内的漆酶-1属于多酚氧化酶家族， 被认为参与昆虫取食过程中的金属离子代谢、 降解植物次生有毒物质以及免疫防御等生理活动。为研究漆酶-1基因在烟粉虱MEAM1隐种Bemisia tabaci Middle East-Asia Minor 1组织中的功能， 利用RACE技术首次...
鲫Kaiso基因cDNA的克隆和表达分析
鲫 Kaiso 基因克隆 表达时空模式
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2013/10/23
在爪蟾和斑马鱼中,Kaiso是一种在整个基因组范围内与甲基化CpG序列特异性结合的转录抑制因子,在调控被甲基化基因表达的时间模式中起重要的作用。为深入研究DNA甲基化对我国重要养殖鱼类生殖和发育的影响,我们克隆了鲫Kaiso基因的cDNA序列, 并对其时空表达模式进行了分析。该cDNA全长3145 bp, 5′-非翻译区132 bp, 3′-非翻译区1117 bp,开放阅读框1896 bp,编码6...
青虾咽侧体抑制激素基因全长cDNA序列的克隆及表达分析
青虾 咽侧体抑制激素 基因克隆 基因表达
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2013/10/24
咽侧体抑制激素(Allatostatin, AST)是一类由几至几十个氨基酸构成的神经肽类激素,在甲壳动物中刺激下颌器官合成甲基法尼酯,影响甲壳动物的蜕皮和生殖。然而AST基因在甲壳动物中的克隆和表达却罕见报道。研究克隆了青虾的AST基因全长cDNA序列,在甲壳动物中使用荧光定量PCR技术检测了AST基因在不同组织中的表达。青虾AST基因cDNA全长2995 bp,包括242bp的5′非编码区(U...
礁石珊瑚为珊瑚礁生态系统中的框架生物, 研究其重要功能基因对于理解造礁石珊瑚对环境变化的响应有重要指示意义. 本研究提取了澄黄滨珊瑚(Porites lutea)的总RNA, 通过RT-RCR得到cDNA, 并以cDNA为模板设计引物进行test PCR, 获得大小为254 bp的ferritin基因cDNA序列. 分析表明, 该部分序列编码了84个氨基酸, 其中包含一个亚铁氧化酶活性功能区, 而...
以绵羊MHC区段BAC克隆酶切片段为探针杂交筛选绵羊混合组织cDNA文库
绵羊MHC 细菌人工染色体 cDNA文库 噬菌斑原位杂交
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2012/8/6
在已知中国美利奴羊MHC(Major histocompatibility complex)区段BAC(Bacterial artificial chromosome)克隆序列信息和预测的基因注释前提下, 用位于中国美利奴羊基因组BAC文库MHC区段的6个BAC克隆酶切片段为探针, 以噬菌斑原位杂交筛选法筛选中国美利奴羊混合组织cDNA文库(库库杂交), 对分离到的cDNA阳性克隆进行全序列测定,...
甜菜夜蛾触角结合蛋白Ⅱ的cDNA克隆、 组织分布及配体结合特性分析
甜菜夜蛾 触角结合蛋白 基因克隆 组织表达谱 配体结合 荧光竞争结合实验
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2013/9/12
触角结合蛋白（antennal binding proteins， ABPs）是气味结合蛋白（odorant binding proteins， OBPs）的一个亚类， 推测其在昆虫嗅觉中起作用。为了探讨这一问题， 本研究通过转录组数据分析并利用RACE技术， 克隆了甜菜夜蛾Spodoptera exigua触角结合蛋白Ⅱ基因（SexigABP2）的全长cDNA序列（GenBank登录号为HQ23...
棉铃虫Helicoverpa armigera (Hübner)幼虫唾液中的各种酶类及各种生化组分在棉铃虫与植物相互作用及协同进化中起到重要作用； 唾液腺是棉铃虫唾液成分的合成器官。本研究通过构建棉铃虫幼虫唾液腺全长cDNA文库， 测序得到1 502条EST序列， 聚类分析后获得821个unigenes， 为筛选棉铃虫与寄主互作信号因子提供基因信息资源。使用Blast2 GO软件对821个unig...
黑曲霉H1的cDNA文库构建及其溶磷相关基因的筛选
黑曲霉 cDNA 文库 基因psgA 有机酸
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2012/3/20
【目的】构建溶磷黑曲霉H1 的cDNA 文库，并从中筛选溶磷相关基因。【方法】利用SMART 技术合成黑曲霉H1 的双链cDNA 并将其连接于pBluescript II SK(+) 载体上，将重组质粒转化E.coli HST08，得到黑曲霉的初级cDNA 文库。利用难溶磷培养基筛选具有溶磷能力的克隆子，测序并利用Blast 分析基因序列。在难溶磷液体培养基中，进行克隆子对溶液pH 值、可溶磷含量...
中肠是苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis (Bt)发挥作用的主要部位， 中肠上很多蛋白被认为是Bt毒素的结合蛋白。为了探索棉铃虫Helicoverpa armigera对Bt的抗性机制， 我们运用RNA转录过程中的5′末端转换机制(Switching Mechanism at 5′ end of the RNA Transcript, SMART）技术构建了棉铃虫中肠的cD...
灰飞虱高带毒（RSV）群体酵母双杂交cDNA文库的构建
灰飞虱 水稻条纹病毒 同源重组 cDNA文库 酵母双杂交cDNA文库
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2011/12/29
为了研究灰飞虱Laodelphax striatellus Fallén与水稻条纹病毒（rice stripe virus, RSV）互作机制， 本研究构建了灰飞虱高带毒群体酵母双杂交cDNA文库。以实验室筛选的灰飞虱高带毒群体为材料， 分离纯化mRNA， 反转录合成双链cDNA， 并连接三框型接头， 层析柱分级纯化。采用同源重组反应制备三框型cDNA入门文库， 再通过同源重组将入门文库转移到Ga...
过氧化氢酶 (catalase, CAT)作为生物体内的重要物质， 其主要功能是参与活性氧代谢过程， 在清除H2O2、 超氧自由基和过氧化物以及阻止羟基自由基形成等方面发挥着重要作用。本研究利用RT-PCR技术和RACE方法首次克隆和分析了甜菜夜蛾Spodoptera exigua （Hübner）CAT基因， 命名为SexiCAT， GenBank登录号为JN051294， 其cNDA序列全长为...
小地老虎β-微管蛋白基因的cDNA序列的克隆、序列分析和表达检测
小地老虎 cDNA克隆 微管蛋白 序列分析 蛋白结构 基因表达
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2011/11/30
β-微管蛋白在昆虫生长发育、 信号传导、 抗药性等方面具有重要作用。本研究以小地老虎Agrotis ypsilon (Rottemberg)3龄幼虫为材料， 利用RT-PCR、 cDNA末端快速扩增技术（RACE）克隆得到小地老虎β-微管蛋白基因的cDNA序列， 命名为AgTubB （GenBank登录号： JN029962）， 并检测了该基因在不同生长发育阶段及不同器官中表达的情况。序列分析表明...
茶树肌动蛋白基因（CsActin1）全长cDNA克隆与生物信息学分析
茶树 肌动蛋白基因 CsActin1 RACE 序列分析
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2012/3/22
以茶树（Camellia sinensis）萌动芽为材料，根据茶树萌动芽芽抑制消减杂交文库中分离得到的肌动蛋白（actin）基因的5′-片段设计引物，利用3′-RACE技术克隆了其cDNA全长序列，该基因cDNA全长1 470 bp，命名为CsActin1（GenBank登录号HQ235647）。序列分析表明，CsActin1开放阅读框长1 134 bp，编码377个氨基酸，5′非编码区100 b...
枫长镰管蚜气味结合蛋白OBP3的cDNA克隆和序列分析及其成虫嗅觉行为反应测定
枫长镰管蚜 气味结合蛋白 报警信息素 E-&beta -法尼烯（EBF） cDNA克隆 四臂嗅觉仪
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2011/12/1
枫长镰管蚜Drepanosiphum platanoidis是少数几种不分泌E-β-法尼烯 (E-β-farnesene, EBF)的蚜虫之一。ApisOBP3是首个被鉴定的特异结合EBF的昆虫气味结合蛋白，来自于豌豆蚜Acyrthosiphum pisum。本研究通过基因克隆技术，在枫长镰管蚜体内获得2个表达ApisOBP3类似蛋白的cDNA序列，长度均为426 bp，其中， 5′末端的69 b...
应用RT - PCR 方法对海南坡鹿细胞分裂周期蛋白42 (Cell division cycle 42,CDC42)编码区进行扩增,将扩增产物与PET - 42a 载体连接,重组质粒鉴定正确后,进行生物信息学分析;构建pET42a - hdCDC42 表达载体,经IPTG 诱导表达,将表达产物进行SDS - PAGE、可溶性分析、纯化及Western blot 分析。结果表明,海南坡鹿CDC42...